注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

高密度脂蛋白为血清蛋白之一，主要由肝脏合成，运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子，俗称“血管清道夫”，对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。

测定原理

用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇，利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸，从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在500nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品

离心机，恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存。临用前加5mL试剂四充分溶解。

试剂四：液体10mL×1瓶，4℃保存。

标准品：液体1mL×1支，4℃保存。

样品处理

取血后3小时内分离血清，将血清样品与试剂一按照1:1的比例充分混匀，25℃静置15min，2000g离心15min，上清置于冰上待测。

测定操作表

	空白管	标准管	测定管
蒸馏水（μL）	4
标准品（μL）		4
样本（μL）			4
试剂二（μL）	150	150	150
试剂三（μL）	50	50	50
混匀，37℃静置30min，于1mL玻璃比色皿，空白管调零，测定500nm处吸光值A。分别记为A标准管和A测定管

计算公式

用微量石英比色皿测定的计算公式如下

HDL-C含量（mmol/L）= A测定管÷A标准管×C标准管

=5×A测定管÷A标准管

C标准管：5mmol/L

b．用96孔板测定的计算公式如下

HDL-C含量（mmol/L）= A测定管÷A标准管×C标准管

=5×A测定管÷A标准管

C标准管：5mmol/L

注意事项

样本切勿反复冻融，最好在取血后12小时内完成测定。

配置好的试剂三4℃保存可半个月。

线性范围为0.15mmol/L-3.8mmol/L。