QY-NGS DNA Selection Beads （NGS DNA建库分选磁珠）

产品描述

QYNGS DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization固相载体可逆固定化)原理，配合精心优化过的缓冲液体系，超顺磁珠选择性地与100 bp 及更大的 DNA 片段结合，并通过简便的洗涤步骤有效去除多余 dNTP、引物、引物二聚体、盐离子和其他杂质，可用于二代测序文库构建过程中的DNA片段分选、纯化。

本产品可适用于各品牌的DNA、RNA建库试剂盒，和广泛使用的Beckman AMPure XP Beads使用方式相同，片段回收效率和文库大小分布均与AMPure XP Beads高度吻合。

规格与货号

5ml   货号QYR6388-0

60ml  货号QYR6388-1

450ml 货号QYR6388-2

运输与保存方法

冰袋运输。2 ~ 8℃保存，效期18个月。避免冷冻！

使用方法 

1. 准备工作

将磁珠由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。配制75%乙醇水溶液。

2. DNA分选（两步法，主要用于DNA文库构建）

DNA分选操作流程如图1所示，具体操作如下。

1）请涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证混匀，充分混匀后，混合物的颜色应呈均相状态。

2）向DNA溶液中加入0.8倍体积的第一轮分选磁珠（如初始体系为100μL，则需加入80μL磁珠溶液），涡旋混匀或移液器吹打10次混匀。

3）室温孵育5 min。

4）将离心管短暂离心并置于磁力架中，待溶液澄清后（约1-5 min），小心转移上清到干净的离心管中。

5）向上清中加入0.2倍初始体积的第二轮分选磁珠（如初始体系为100μL，则第二步加入20μL磁珠溶液）。

6）涡旋混匀或移液器吹打10次混匀，室温静置5 min。

7）将离心管短暂离心并置于磁力架中，待溶液澄清后（约5 min），小心移除上清。

8）保持离心管始终处于磁力架中，加入200 μL新鲜配制的75%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 s，小心移除上清。

9） 再漂洗一次，即重复步骤8。

10）保持离心管始终处于磁力架中，开盖干燥磁珠至刚刚出现龟裂（约5 min）。

11）将离心管从磁力架中取出，加入适量ddH2O（≥20 μL），涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打充分混匀，室温孵育5 min。

12）将离心管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体。待溶液澄清后（约1-5 min），小心吸取上清至干净的管中，即完成纯化DNA分选。

3. 一步法DNA纯化（可以纯化不同分子量大小的DNA，如100bp-10Kb）

1）平衡并混匀磁珠溶液。

2）加入1.5倍体积的磁珠溶液（如初体积为100 μL，则加入150 μL磁珠），涡旋混匀或移液器吹打10次混匀。

3）室温孵育5 min。

4）将离心管短暂离心并置于磁力架中，待溶液澄清后（约1-5 min），移除上清。

5）加入250 μL新鲜配制的75%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 s，小心移除上清。

6） 再漂洗一次，即重复步骤5。

7）保持离心管始终处于磁力架中，开盖干燥磁珠至刚刚出现龟裂（约5 min）。

8）将离心管从磁力架中取出，加入适量ddH2O（≥20 μL），涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打充分混匀，室温孵育5 min。

9）将离心管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体。待溶液澄清后（约1-5 min），小心吸取上清至干净的管中，即完成DNA纯化。

 注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）进行长度分选时，初始样品体积需≥100μL，不足时请用超纯水补齐。样品体积太小，将导致移液误差增大，影响分选的准确性。

3) 相比涡旋，移液器混合效果更佳，其结果更具可重复性。

4) 置于磁力架上的吸附时间，根据磁力架吸附强度而异，一般1-5min，待溶液澄清后，再继续下一步操作。

5) 将混匀样品与磁珠一起置于室温下孵育，要满足5分钟，以获得最大回收率。

6) 孵育吸取上清液时，不需要吸的太干净，可以保留 3-5 μl 上清液，以避免磁珠会与上清液一同被吸出。漂洗吸取上清液时，磁珠在乙醇中不易被吸取，因此无需保留上清液。

7) 吸附过程中，需保证磁力架稳定，请勿扰动磁珠。

8) 为确保完全去除所有乙醇，可以增加磁珠干燥时间。不过也没有必要过度干燥磁珠（若干燥过度，磁珠会出现裂痕），从而大幅降低洗脱效率。

9) 为使洗脱充分，可适当增加洗脱缓冲液体积。若使用小体积的洗脱缓冲液，可能降低DNA的洗脱率。但有助于增加DNA浓度，这种情况需增加混匀次数（以确保液体与磁珠充分接触）。洗脱后，也可将样品与磁珠一同储存至冰箱，磁珠在下游的酶促反应中呈惰性。

10) 本产品仅用于科研。