中文名称:考马斯亮蓝染色液
英文名称:Coomassie Brilliant Blue R250 Protein Stain Reagent
目录号:QYR005
规格:500ml
保存条件:室温(15-25℃)
保质期:1年
溶液组成:
0.25% Coomassie brilliant blue R250, 10% acetic acid, 40% methanol
产品描述:
考马斯亮蓝R250染色液是一种常用蛋白染色剂,可用于SDS-PAGE等蛋白电泳胶的常规染色,或WB转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
本试剂将考马斯亮蓝R250溶解于包含25%-50%甲醇的酸性溶液中。在酸性条件下,考马斯亮蓝R250染料与蛋白中的碱性氨基酸
(精氨酸、赖氨酸、组氨酸)残基结合,使蛋白显色。与蛋白结合的考马斯亮蓝染料从红棕色变为亮蓝色,其最大吸收峰为595nm。
使用本试剂进行染色,采用常规方法1小时可以完成染色,采用快速染色方法数分钟即可完成染色。本试剂可与考马斯亮蓝脱色液(QYR006)配套使用。
常规染色脱色实验流程:
电泳结束后,将电泳胶放入大小合适的枪头盒或培养皿中,加入适量考马斯亮蓝染色液,确保染色液可以充分覆盖电泳胶。
置于水平摇床上缓慢摇动,室温染色1h。
倒出染色液(染色液可回收使用若干次),用水简单清洗凝胶表面,倒入适量考马斯亮蓝脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。
置于水平摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24h。期间更换脱色液2-4次,直至蓝色背景基本脱掉,蛋白条带染色清晰。
快速染色脱色实验流程:
电泳结束后,将电泳胶放入大小合适的枪头盒或培养皿中,加入适量考马斯亮蓝染色液,确保染色液可以充分覆盖电泳胶。
将胶盒放入微波炉中加热至沸腾,立刻停止加热。在染色液温度较高的情况下,置于水平摇床上缓慢摇动,染色10min.
倒出染色液(染色液可回收使用若干次),用水简单清洗凝胶表面,倒入适量考马斯亮蓝脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。
将胶盒放入微波炉中加热至沸腾,立刻停止加热。在染色液温度较高的情况下,置于水平摇床上缓慢摇动,脱色10min。此时可以
观察到比较清楚的蛋白条带。
更换新鲜的脱色液,重复上一步,直至蓝色背景基本上全部脱掉,蛋白条带染色效果达到预期。