注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。

测定原理：

在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在760nm处有特征吸收峰，测760nm处的吸光值，即可得样品总酚含量。

自备实验用品及仪器：

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：60%乙醇，自备。

试剂一：液体3mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。

总酚提取：

直接检测

测定操作表：

分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至760nm，蒸馏水调零。

操作表

	对照管	测定管
样本待测液（µL）	10	10
试剂一（µL）		50
混匀，25℃静置2min
试剂二（µL）	50	50
H2O（µL）	140	90
混匀，25℃静置10 min，于微量石英比色皿/96孔板中，测定760nm吸光值，ΔA=A测定-A对照。

总酚含量计算公式：

标准曲线：y = 2.808x+0.0012，R2 = 0.9994

总酚含量（mg/g 干重）=（ΔA-0.0012 ）÷2.808

= 0.356×（ΔA–0.0012 ）

注意事项：

1. 吸光值大于2，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。

2. 试剂一对皮肤有一定的刺激性，请操作时做好防护措施。

3. 最低检出限为2.4 μg/g。