钙是植物结构组成元素,主要构成果胶酸钙、钙调素蛋白、肌醇六磷酸钙镁等,在液泡中有大量的有机酸钙,如草酸钙、柠檬酸钙、苹果酸钙等。钙能稳定细胞膜、细胞壁,还参与第二信使传递,调节渗透作用,具有酶促作用等。
测定原理
用蒸馏水提取植物样品,采用火焰光度计测定样品中的钙含量。
自备实验用品及仪器
天平、烘箱、100目筛、移液管、浓硫酸、离心机、蒸馏水、火焰光度计。
试剂组成和配制
标准品:液体20mL×1瓶,4℃保存。浓度为1mmol/L母液。
样本处理
将植物组织烘干粉碎,按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)研磨匀浆震荡提取3h,10000g,25℃离心10min,取上清待测。
测定操作
1.标准曲线绘制
标准品(mL)
0
0.08
0.4
2
10
蒸馏水(mL)
10
9.92
9.6
8
0
标准品浓度(μmol/L)
0
8
40
200
1000
2.样品测定
取样品用火焰光度计测定,若浓度为1000μmol/L以上则进行适当稀释。
计算公式
全钙含量(g/kg 干重)= C×V总×稀释倍数÷W×10-3×40
C:样品浓度;μmol/L;V总:加入提取液体积,100mL= 0.1L,W:样本质量,g
注意事项
未经特殊处理的样品消解为白色或无色即消解完全,否则延长消解时间继续消解至消解液发白。
每次开机需做标准曲线。
配方
标准品:配方
标准品:1mmol/L CaCl2溶液 取100mL试剂瓶,称11.1mg氯化钾溶于100mL蒸馏水