注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

Hg2+是水体中重要有毒重金属离子，易被生物体吸收并且积累，能够通过食物链进一步传递，从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。

测定原理：

水样经消化后，在酸性环境中，Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物，溶于三氯甲烷，在490nm测定吸光度，即可计算Hg2+含量。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、可调式移液枪、浓硫酸、三氯甲烷和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体50mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体8mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加蒸馏水2mL充分溶解。

试剂四：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂五：粉剂×1瓶，4℃避光保存。加三氯甲烷（自备）50 mL充分溶解。

标准品：液体1mL×1瓶，4 nmol/mL Hg2+，室温保存。

水样中汞离子检测：

1. 消化

（1）水样消化：取带盖管，依次加入1mL水样，100 μL浓硫酸（自备），800μL试剂一，混匀后盖紧，置于40℃水浴中消化24 h。

（2） 标准品消化：取带盖管，依次加入100μL标准品，900μL蒸馏水，100 μL浓硫酸，800μL试剂一，混匀后盖紧，置于40℃水浴中消化24 h。

2. 取出各管，室温放置约20min，使之冷却。然后加入160μL试剂二，盖紧后充分震荡，直到无色。开盖静置30min，期间摇荡数次，使其中气体溢出。

3. 加入800μL蒸馏水，40μL试剂三；盖紧后混匀后，静置5min；加入200 μL试剂四，充分震荡后静置分层。

4. 取100μL移液枪，排气后，沿管壁小心插入下层，吸取100μL下层液体，加入到EP管中，再加入1 mL试剂五，盖紧后充分震荡，直到无色。

5. 静置分层后，取1000μL移液枪，调节刻度到700μL，排气后沿管壁小心插入下层，吸取700μL下层液体，加入1mL玻璃比色皿，于490nm处比色，记录各管吸光值。

注意：标准管只需测定一次。

计算公式：

Hg2+（nmol/L）= C标准品÷标准品稀释倍数×A测定管÷A标准管×V总

= 400×A测定管÷A标准管

C标准品：标准品浓度，4 nmol/mL；标准品稀释倍数：（100μL标准品+900μL蒸馏水）÷100μL标准品=10；V标：0.1 mL；V总：1L=1000 mL。

注意事项：

1. 水样中1000μg/L铜离子，20μg/L银离子，10μg/L金离子，5μg/L铂离子对测定无干扰。

2. 测定过程中应注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到有毒及危险试剂。

3. 最低检出限为0.1μmol/L。