注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

Cr6+主要来自电镀、冶炼、表面处理工业等排放的污水和废气。通过消化道、呼吸道、皮肤及粘膜Cr6+进入人体，造成伤害，甚至引起遗传变异而致癌。

测定原理：

在酸性环境中，Cr6+与二苯碳酰二肼作用生成紫红色络合物，在540nm有特征光吸收。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、丙酮和蒸馏水。

试剂组成和配制：

标准品：液体1mL×1支，6 nmol/mL Cr6+，室温保存。

试剂一：液体4mL×1瓶，室温保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加2.8 mL丙酮充分溶解，颜色变深后不能再用。

水样中六价铬离子检测：

1. 分光光度计预热30 min，调节波长到540 nm，蒸馏水调零。

2. 标准管：取1mL玻璃比色皿，加入100 μL标准液，900μL蒸馏水，混匀；加50 μL试剂一，50 μL试剂二，充分混匀；室温下静置10min，于540 nm测定吸光度，记为A标准管。

3. 水样测定：

（1）无色水样直接测定：取1mL玻璃比色皿，加入1mL无色水样，50 μL试剂一，充分混匀；再加入50 μL试剂二，充分混匀；室温下放置10min。于540 nm测定吸光度，记为A测定管。

（2）有色水样：取1mL玻璃比色皿，加入1mL水样，50 μL试剂一，盖紧混匀后置于沸水浴中2 min，退色；冷却后加50 μL试剂二，充分混匀；室温下放置10min。于540 nm测定吸光度，记为A测定管。

注意：标准管只需测定一次。

六价铬离子浓度计算：

CCr6+(nmol/L)= C标准管÷标准品稀释倍数×A测定管÷A标准管×V总

= 600×A测定管÷A标准管

C标准：6 nmol/mL=6000 nmol/L；标准液稀释倍数：（100 μL标准液+900μL蒸馏水）÷100 μL标准液=10；V总：1 L。

注意事项：

1. 水样中铁约50倍于六价铬时，产生黄色，干扰测定，不宜用本试剂盒进行测定；10倍于铬的钒可产生干扰，但显色20min后钒与试剂所显色全部消失；200mg/L以上的钼与汞有干扰；

2. 六价铬离子为重金属有毒离子，测定过程中应注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到。

3. 最低检出限为1mmol/L。