注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX一般分离自最适生长pH为6-8的微生物。

测定原理

NEX在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算NEX活力。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。

试剂组成和配制

缓冲液：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体5mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体25mL×1瓶，4℃避光保存。

样品处理

新鲜土样风干，过30-50目筛。

测定操作表

	对照管	测定管
土样（g）	0.1	0.1
缓冲液（μL）	600	400
试剂一（μL）		200
混匀，50℃震荡反应30min，立即90℃水浴10min，8000g，25℃离心10min，取上清500μL
试剂二（μL）	500	500
混匀，90℃水浴中显色5min，蒸馏水调零，1mL玻璃比色皿测定540nm处吸光值A，分别记为A对照管、A测定管，△A=A测定管-A对照管。

S-NEX计算公式

标准曲线：y = 1.6904x + 0.0058，R2 = 0.9989

酶活定义：50℃，pH6.0条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。

S-NEX活力（μmol/d/g 土样）=（△A -0.0058）÷ 1.6904×V反总×103÷ W÷T÷ 150

= 113.58×（△A -0.0058）÷ W

V反总：反应总体积，0.6mL；T：反应时间，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。

注意事项

1. 保证震荡反应30min，使酶与底物充分接触。

2. 注意90℃水浴防止爆开，以免改变反应体系。