产品简介:
pRSFDuet-1质粒是一种原核表达载体, N端含有一个6×His标签,C端含有一个S标签。该质粒含有多个常用的酶切位点,便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导,目的基因被克隆到质粒载体上,受噬菌体强转录及翻译信号控制。该质粒还携带有RSF复制因子、lacI基因和氯霉素抗性基因。可以使这个pETDuet-1载体在一个适当的宿主菌株的coexpression 4目标基因插入MCS1的基因可以使用ACYCDuetUP1引物和DuetDOWN1引物进行测序。插入MCS2的基因可以用DuetUP2引物和T7进行排序。
pRSFDuet-1 is designed for the coexpression of two target ORFs. The vector contains two multiple cloning sites (MCS), each of which is preceded by a T7lac promoter and ribosome binding site (rbs). The vector also carries the RSF1030-derived RSF replicon, lacI gene and kanamycin resistance gene (KnR). This vector can be used in combination with pACYCDuet™-1 , pCDFDuet™-1 , and pETDuet™-1 in an appropriate host strain for the coexpression of 4 to 8 target proteins. ORFs inserted into MCS1 can be sequenced using the ACYCDuetUP1 Primer and DuetDOWN1 Primer . ORFs inserted into MCS2 can be sequenced using the DuetUP2 Primer and T7 Terminator Primer . Unique sites are shown on the circle map.
产品参数:
质粒分类: 大肠系列质粒;大肠其它质粒;大肠双框质粒
质粒大小: 3829bp
质粒标签: N-6×His,C-S
原核抗性: 卡那青霉素Kan(50μg/ml)
克隆菌株: DH5α等大肠杆菌
培养条件: 37℃,有氧,LB
表达宿主: BL21(DE3)等大肠杆菌
培养条件: 37℃,有氧,LB
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: ACYCDuetUP1-F(GGATCTCGACGCTCTCCCT) DuetUP2-F( TTGTACACGGCCGCATAATC)
3'测序引物: DuetDOWN1-R( GATTATGCGGCCGTGTACAA) T7-ter-R( TGCTAGTTATTGCTCAGCGG)
备注: 同时表达两个外源蛋白
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗等其他用途。
2、使用甘油菌可不完全融解,在菌液表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可。完全融解后使用,菌体会逐渐沉淀至管底,请混匀后使用。随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。