中文名:溶菌酶溶液(100mg/ml)
英文名:Lysozyme solution(100mg/ml)
储存条件:-20 °C
产品简介:
溶菌酶主要用于酶分解细菌的细胞壁;用于制备原生质球。
溶菌酶水解肽聚糖中 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基间的 β(1→4) 键以及壳糊精中 N-乙酰基-D-葡糖胺残基间的 β(1→4)键。革兰氏阳性细胞对该水解作用非常敏感,因为它们的细胞壁含有较高比例的肽聚糖。由于存在外膜以及比例较低的肽聚糖,革兰氏阴性细菌对该水解作用不太敏感。然而,细菌外膜中如果存在与金属离子螯合的 EDTA,那么这些细胞也可能被水解。
该酶在较宽的 pH 范围(6.0 到 9.0)内具有活性。与 pH 为 9.2 时相比,pH 为 6.2 时可在更广的离子强度(0.02 到 0.100M)范围内观察到最大活性。
使用方法(仅供参考):
1. 细菌基因组提取
将 0.1-1.5 mL 过夜培养的革氏阳性细菌 12,000 rpm 室温离心 1 分钟后,重悬与0.6mL的20mg/mL的溶菌酶溶液中颠倒混匀 5-10 次后放 37℃保温至少 30 分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间,需要自己根据 不同的细菌摸索)。后续可以按照革兰氏阴性菌操作。
2.酶裂解法制备大肠杆菌细胞提取物
加入终浓度0.25mg/mL的溶菌酶,颠倒混匀后冰上放置30分钟,后37℃孵育5分钟(期间每隔30秒颠倒混匀一次),重新置于冰上孵育30分钟。