中文名:RNAse A溶液(10mg/ml)
英文名:RNAse A solution(10mg/ml)
保存溶液:10mM乙酸钠,50mM Tris-HCl pH7.4
DNase and Proteinase: Free
储存条件:-20°C
保存时间 :2年
产品简介:
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,RNase A),简称RNase A。来源于牛胰,一种含4个二硫键的单链多肽,分子量约为13.7 kDa。作为一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease),特异性降解单链RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)残基。具体来说,切割识别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键,从而使得2’,3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-pG)。
核糖核酸酶A(RNase A)最常见的实验应用,是在提取质粒DNA或基因组DNA过程中,去除RNA。因此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一。本试剂已经水浴煮沸灭活DNase。本试剂还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。
本试剂以溶液形式提供,浓度为10 mg/mL。推荐工作浓度为1-100 ug/mL,因应用类型的不同而异。
使用方法:
本产品为10mg/mL的RNase A溶液,不含DNase 和蛋白酶活性,可以用于基因组DNA以及质粒提取过程中RNA的降解,也可用于蛋白纯化中RNA污染的去除。
质粒提取中RNaseA的使用:
RNaseA在质粒中的终浓度推荐为100μg/mL,即在质粒溶液中按照1/100体积加入10mg/mL RNaseA即可,如50μL质粒中加入0.5μL RNaseA溶液,37℃孵育10分钟。亦可将10mg/mL RNase A溶液按照每mL质粒提取溶液I加入约20μL RNase A溶液,充分悬浮菌体后37℃孵育10分钟,直接进行质粒提取实验。