1. 荧光染色—工作原理
由于其独特的电子构型,荧光物具有典型的吸收(激发)和发射光谱。 单一染色在特定波长被激发,在另外一个波长发射光子。
复合染色由距离非常近的、能量可以在彼此之间传递的一个供体及一个受体荧光物分子所组成。复合染色在受体分子的激发波长 被激发,在供体分子的发射波长发射一个光子。
激发和发射光谱图
单一染色能量水平图解
单一染色能量水平图解
单一染色:
1、为染色而设置在激发波长的激光为荧光物分子中的电子提供电磁能量。
2、电子在下一个能级 (Es) 跃迁至一个激发状态。
3、能量被以光子(荧光)的形式释放,电子移回至较低的能级 (Gs)。
复合染色:
4、在通过激光(图示中 1-2)提供了能量的电子激发状态下,能量被供体分子中的一个电子释放后,被受体分子中的一个电 子所吸收。
5、受体分子中的电子在下一个能级 (Es) 跃迁到激发状态,和单一染色一样,能量被以光子(荧光)的形式所释放,然后电子 回到较低能级 (Gs) 的状态。
2、荧光染料表
核酸探针