ViTrans Transfection Reagent
货号:QYR025 1ML
保存:4℃ 运输:2~8℃
【产品概述】
本公司生产的ViTrans是一种高效、便捷、重复性好的瞬时转染试剂。ViTrans转染试剂采用了专利配方,可将核酸转染至HEK293或HEK293T细胞中,转染效率在90%以上,主要用于慢病毒、逆病毒、腺相关病毒等系统的病毒包被。
【适用范围】
慢病毒、逆病毒、腺相关病毒等系统的病毒包被。
ViTrans试剂实验方案
以10cm平板按照以下流程包被慢病毒为例。使用适量的质粒DNA和对应体积的ViTrans试剂。
使用10cm平板,在转染前24小时对细胞进行铺板,转染时细胞汇合度达到60~80%;
在转染前1-2小时,更换8ml含2%血清的培养基,继续培养;
准备ViTrans-DNA混合物(按顺序添加)
在1.5ml离心管中加入1ml DMEM,再加入相应慢病毒骨架载体及包装载体;
用移液器轻轻混匀质粒DNA;
加入质粒质量2~4倍体积的ViTrans到上述质粒DNA中;
涡旋至少5秒,使质粒DNA和ViTrans混合均匀;
室温条件下静置20分钟,形成ViTrans-DNA复合物;
轻轻混匀3次
将上述混合液加入到含细胞的10cm平板中;
将细胞在培养箱中继续培养4~6小时,更换为完全培养基;
转染36~48小时后观察细胞转染效率,换液后48小时收集病毒上清。
【注意事项】
不同培养体系包被慢病毒试剂用量
Culture Vessel
Volume (ml)
Plasmid DNA (μg)
DMEM (ml)
ViTrans (μl)
6-well palte/well
2
3
0.3
6-12
35 mm dish
2
3
0.3
6-12
60 mm dish
4
8
0.5
16-32
100 mm dish
8
20
1.0
40-80
注:以上举例为常规慢病毒转染系统,仅供参考。实际操作时,因不同系统存在差异,可根据以上操作流程进行调整,确定最优转染体系。
ViTrans与质粒DNA最佳体积质量比为2~4,比例为2时可实现较佳转染效率。
【备注】
本产品仅供科研使用。在所有情况下,本公司对此产品所承担的责任,仅限于此产品的价值本身。