BCA蛋白定量试剂盒
中文名称：BCA蛋白定量试剂盒
英文名称：BCA Protein Assay Kit
规格：500 微孔（50次检测，一次梯度检测大概用10孔） 和10×500 微孔
保存条件：室温（15-25℃），4℃
保质期：1年
500 微孔 包含试剂：
试剂盒组成
试剂盒组成英文名称
含量-500test
BCA试剂A
BCA solution A
100ml
BCA试剂B
BCA solution B
3ml
BSA标准品 (5mg/ml)
BSA standard (5mg/ml)
1ml
PBS稀释液
PBS solution
30ml
保存条件：BSA标准品常温运输，4℃保存，其他组分室温保存。
产品简介
BCA法的原理是，在碱性环境下，蛋白质与Cu2+络合，将Cu2+还原为Cu+。Cu+与BCA结合，形成稳定的蓝紫色复合物。
该复合物在562nm处有较高的吸光值，并与蛋白浓度呈正比。待测样本的吸光度与蛋白标准曲线比较，即可计算出样本中的蛋白浓度。
BCA法可兼容常用浓度的SDS，TritonX-100，Tween等，但受螯合剂（EDTA, EGTA），还原剂（DTT，β-巯基乙醇）的影响。
实验例：
实验名称：BCA法蛋白定量
1. 配制工作液：根据标准品和样本数量，按BCA试剂A：BCA试剂B=50:1的体积比配制成BCA工作液。充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品。将5mg/ml的BSA标准品用PBS稀释成2mg/ml，1mg/ml，0.5mg/ml, 0.25mg/ml, 0.125mg/ml, 0.0625mg/ml, 共6个梯度。
另设一个PBS的空白对照。
3. 将样本作适当稀释，常用稀释比例2倍，5倍。也可不稀释直接加样。
4. 将配制好的BCA工作液加到96孔板中，每孔加入200ul，并做一组平行孔。
5. 将稀释好的蛋白标准品与样本依次加入已有BCA工作液的孔，混匀。每孔加入20ul，并做一组平行孔。
6. 将96孔板用铝箔纸包裹住，放入37℃孵箱，避光孵育30分钟。
7. 用酶标仪在562nm处测定吸光度值。
8. 根据蛋白标准品浓度和吸光度值绘制蛋白标准曲线，根据标准曲线和样本吸光度值计算出样本蛋白浓度。
