聚合物羧基磁珠(QYM4006)
聚合物羧基磁珠,核心结构为Fe₃O₄超顺磁核,外壳为聚合物。磁珠表面富含羧基(-COOH)官能团,可在EDC/NHS等活化剂作用下,与含伯胺基(-NH₂)的蛋白、抗体、多肽、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联形成稳定的酰胺键。
本产品通过细乳液聚合法制备,聚合物壳层与磁核以化学键连接,确保了壳层的稳定性和官能团的高密度分布,兼具超顺磁性、快速磁响应性和良好的分散性,是医学与分子生物学研究中理想的固相载体工具。
主要参数
产品名称:聚合物羧基磁珠;羧基磁珠;Mag COOH
货号:QYM4006
内核:Fe3O4
平均粒径:300nm
壳层材质:聚合物
浓度:10mg/ml
保存条件:2-8℃,可在室温运输或短暂保存
保存液:20%乙醇PBS溶液
保质期:2年
产品性能
1. 超顺磁性:磁核为Fe₃O₄,无外加磁场时无剩磁,磁珠在溶液中可均匀分散;外加磁场时可快速富集,便于分离和洗涤操作。
2. 化学稳定接枝:聚合物壳层通过KH-570硅烷偶联剂以化学键方式接枝于磁核表面,相较于物理包覆,壳层不易脱落,使用稳定性更高。
3. 高羧基密度:通过引入甲基丙烯酸(MAA)共聚单体,可在表面提供丰富的羧基位点,保障对生物配体的高载量偶联。
4. 良好分散性与低非特异性吸附:聚合物壳层的亲水化修饰使磁珠在水中及常见缓冲液中分散良好,非特异性吸附低。
应用方向
1. 蛋白纯化:偶联抗体或亲和配体,用于目标蛋白的亲和捕获与纯化。
2. 细胞分选:偶联特定细胞表面标志物抗体,实现目标细胞的正选或负选。
3. PCR产物纯化及核酸提取
具体应用
(一)生物配体的偶联
1. 基本原理:磁珠表面的羧基经EDC和NHS活化后,与配体上的氨基(-NH2)形成稳定的共价键,将其牢牢固定在磁珠上,使磁珠能够特异性地捕获或分离目标分子。
2. 可偶联的配体种类及应用:(仅供参考)
可偶联的配体
应用
pA/pG/pAG
可从血清样品中分离出纯度较高的抗体
特定标签序列的
单克隆抗体
结合并捕获带有对应标签的融合蛋白,用于免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)和蛋白纯化
链霉亲和素
结合生物素化蛋白、多肽、及非蛋白质等分子,快速分离生物素化成分,进行如亲和纯化,细胞分离,DNA探针分析和mRNA分离等多方面应用
Oligo(dT)序列
可与真核生物 mRNA 尾部的 Poly A 互补配对。可高效地从真核生物总 RNA 或直接从动植物组织或细胞裂解物中快速分离出完整、高纯度的 mRNA。
(二)核酸提取(以提取口腔拭子基因组DNA为例,仅供参考)
技术路线:
收集口腔拭子中的细胞样本→加入适量裂解液和蛋白酶K,裂解细胞→加入RNase A去除RNA→加入异丙醇沉淀DNA→加入磁珠,吸附溶液中的DNA→磁分离,弃上清后用洗涤液多次洗涤DNA→加入洗脱液将DNA从磁珠上洗脱。
(三)PCR产物纯化
技术路线:
向PCR产物中加入磁珠→PCR产物中的DNA与磁珠结合→磁分离,弃上清后用70%乙醇多次洗涤DNA→从磁珠上洗脱纯化DNA片段。
(四)DNA分选
技术路线:
第一轮分选:向片段化DNA中加入第一轮分选磁珠→磁分离后,丢弃磁珠上的大片段,将上清转移至新的离心管
第二轮分选:向上清液中加入第二轮分选磁珠→磁分离后,丢弃上清中的小片段→用80%乙醇清洗磁珠,开盖干燥→加入双蒸水洗脱磁珠上的DNA。
注:第一轮和第二轮分选中磁珠与待分选样品的比例,根据分选的DNA片段大小不同而有所不同。
注意事项
1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前,请务必充分振荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。
3. 使用过程中可根据需求,用纯化水或缓冲液洗涤磁珠 2~3次,以去除保存液中乙醇。
4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
5. 为保证最佳的实验结果,请选用合适的配体进行共价偶联反应。
6. 本产品仅供研究使用。
注:本产品仅用于科研用途,不用于诊断和治疗。
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