BL21(DE3)甘油菌菌株
包装规格:500ul甘油菌
保存条件:-20℃ 可保存3个月,-80℃可长期保存。
产品简介:
BL21(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)。其中ompT可减少外膜蛋白酶的表达量,从而减少重组蛋白的水解,提高表达产量;hsd基因变异可致菌株细胞内的I型限制酶EcoK或EcoB活性缺失,从而提高PCR产物的转化效率;dcm可消除甲基化对腺嘌呤和胞嘧啶的影响,从而帮助某些外源质粒复制,比如携带易受甲基化影响的酶切位点的外源质粒。BL21(DE3)甘油菌,是收集生长在对数期的BL21(DE3)菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。本菌株适用于T7启动子(T7 promoter)调控目的基因表达的pET系列等原核表达质粒。
BL21(DE3)是BL21被λ噬菌体DE3溶原化(lysogenization)的衍生菌株,在lacUV5启动子控制下可表达噬菌体T7 RNA聚合酶(相关基因序列已经整合到细菌染色体中)。IPTG可以诱导BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的高表达,因此BL21(DE3)菌株适合受T7启动子(T7 promoter)调控的目的基因通过IPTG诱导表达。常见的pET系列原核表达载体中目的基因的表达都是受T7启动子调控的,因此都适合用BL21(DE3)作为宿主菌。BL21缺失细胞质中的Lon蛋白酶(Lon protease)和胞外膜上的OmpT蛋白酶(OmpT protease),能有效避免重组表达蛋白的降解,所以被广泛用作外源蛋白的表达菌菌株。
注意事项:
使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。
为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。