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果糖(fructose ,FT)含量试剂盒--微量法
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果糖(fructose ,FT)含量试剂盒--微量法
市场价格
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商品描述

商品属性

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。

测定原理:

果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100ml×1瓶,4℃保存;

试剂一:1mg/mL标准液10mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体 25ml×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体 8ml×1瓶, 4℃避光保存;

试剂四:粉剂0.5g×1瓶,常温保存。

果糖提取:

称取0.1~0.2g样本,常温研碎;加入0.5mL提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于80℃水浴锅中10min(盖紧,以防止水分散失),振荡3~5次,冷却后,4000g,25℃离心10min,取上清;加入少量(约2mg)试剂四,80℃脱色30min(盖紧,以防止水分散失);再加入0.5mL提取液,4000g,25℃离心10min,取上清液测定。

测定步骤

分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。

样本测定,(在EP管中依次加入下列试剂):

混匀,95℃水浴反应30min(盖紧,以防止水分散失),冷却后取200μL至微量石英比色皿或96孔板中测定480nm处光吸收值,空白管、标准管和测定管分别记为A1、A2和A3。空白管和标准管只要做一管。

果糖含量计算:

试剂(μL)

空白管

标准管

测定管

样本

   

30

试剂一

 

30

 

蒸馏水

30

   

试剂二

210

210

210

试剂三

60

60

60

1、果糖含量(mg/mg prot)=(C标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行测定蛋白浓度。

2、果糖含量(mg/g鲜重)=(C标准管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。

C标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.03mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

注意:最低检测限为100ng/g鲜重或1ng/mg prot

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