ChamQ SYBR qPCR Master Mix
高灵敏性染料法定量PCR 检测试剂盒
基因表达差异分析;绝对定量分析
· 高效热启动酶:新型抗体法热启动酶Champagne Taq DNA Polymerase,扩增能力强、灵敏度高
· 扩增高度特异:特异性促进因子Exactor,较大程度抑制非特异扩增和引物二聚体
· 扩增性能优异:提供5-35的宽广线性范围和个位数拷贝的检测灵敏度扩增稳定、定量结果具有高度重复性
· 兼容程度:双管ROX,可根据不同仪器进行选择添加。
1. 广阔的定量域
以 HeLa 细胞 cDNA 为稀释液,将 pUC19 质粒进行 8 个 10 倍梯度稀释,第 8 个稀释梯度中质粒拷贝数浓度约为 5 copies/4 μl。使用 ChamQ 预混液对各稀释梯度中的 pUC19质粒进行检测,每孔模板使用量为 4 μl。 可以看到,ChamQ 预混液在宽广的模板量区间内具有优异的线性关系,可轻松检测出个位数拷贝的待测模板。
图1
2. 稳健的重复性图2
以 HeLa 细胞 cDNA 为模板,使用 ChamQ预混液以及竞品染料法 qPCR 试剂 ( 分别来自 Supplier A、B、C、D),在同样的反应条件下检测B2M基因的表达。每种试剂设置 48 孔重复,用以检测扩增稳定性。可以看到,ChamQ 预混液实验结果重复性高。统计结果表明,ChamQ预混液 48 复孔Ct值SD值不足0.05,优势显著。
3. 优异的特异性
图3
以 HeLa 细胞 cDNA 为模板,使用 ChamQ 预混液以及竞品染料法qPCR 试剂(分别来自 Supplier A、B、C、D),在同样的反应条件下检测48个随机挑选的基因,用以检测扩增特异性。统计结果显示,在默认扩增条件下,ChamQ预混液能够以高的特异性完成超过 95% (46/48) 的目标基因检测。
4. 准确的分辨力
图4
以 HeLa细胞cDNA原液以及10个两倍稀释梯度共计11个样品为模板,使用ChamQ 预混液检测P450C17基因的表达, 每个模板设置6个复孔。可以看到ChamQ 预混液可以在宽广的范围内准确分辨 2 倍的模板浓度差异,且扩增高度特异。 统计结果显示,各稀释度之间的平均 △Ct 为 1.09,SD 值仅为 0.08。
ChamQ SYBR qPCR Master Mix 采用的Champagne Taq DNA Polymerase 是一种新型的抗体法热启动聚合酶,具有兼容性广、扩增性能强、灵敏度高等诸多优点,配以特异性促进因子Exactor,平衡了扩增特异性和扩增效率之间的矛盾。在不失扩增特异性的同时,ChamQ 检测体系可以轻松检测到个位数拷贝的基因表达,对目标基因定量准确,可信。
- 30~- 15℃避光保存;Master Mix解冻后可于2~8℃避光条件下稳定存放6个月。
4℃存放6个月;可冻融30次;配制好的混合体系(引物、模板、试剂)可于4℃存放6h。