Thermo Scientific RevertAid 第一链 cDNA 合成试剂盒(含 DNase I)是根据 RNA 模板高效合成第一链 cDNA 的完整系统。该试剂盒含有重组核酸内切酶 (DNase I),可从 RNA 制剂中去除污染的基因组 DNA。
针对反转录应用,此试剂盒使用了 RevertAid 反转录酶 (RT),它是一种 M-MuLV Rt,可在 42 50°C 条件下保持活性且适合合成长达 13 kb 的 cDNA。随试剂盒提供的 RiboLock RNase 抑制剂可有效防止 RNA 模板降解。
随 RevertAid 第一链 cDNA 合成试剂盒提供 oligo(dT)18 和随机六聚体引物。oligo(dT)18 引物可选择性地与 mRNA 的多聚腺苷酸尾退火结合。随机六聚体引物不需要多聚腺苷酸尾,因此可用于转录 mRNA 的 5' 端区域,或用于缺乏多聚腺苷酸尾的 RNA 种属(如 microRNA)的 cDNA 合成。基因特异性引物也可与试剂盒配合使用。
主要特点
• 集成基因组 DNA 去除步骤
• 长达 13 kb 的全长第一链 cDNA
•极佳反应温度 42°C
• 全套试剂盒 — 含有 RT 反应所需的所有组分
应用
• 用于 RT-PCR 和 RT-qPCR 的第一链 cDNA 合成
• 全长 cDNA 文库构建
• 反义 RNA 合成规格产品规格试剂盒反应速度60 min。技术反转录最佳反应温度42°C数量100 reactions逆转录酶RevertAid核糖核酸酶 H 活性是适用于(应用)cDNA 合成, RT-PCR最终产品类型第一链 cDNA反应次数100 次反应反应形式单独组分试剂类型反转录尺寸(最终产品)长达 13 kb原始材料RNAUnit SizeEach
内容与储存1盒,包含:
• RevertAid 逆转录酶, 1 x 120 μL (200 U/μL)
• RiboLock RNase 抑制剂, 1 x 120 μL (20 U/μL)
• 5X 反应缓冲液, 1 x 500 μL
• dNTP 混合物, 1 x 250 μL (10 mM)
• Oligo(dT)18 引物, 1 x 120 μL (100 μM)
• 随机六聚体引物, 1 x 120 μL (100 μM)
• 对照 GAPDH RNA, 1 x 20 μL (0.05 μg/μL)
• 正向 GAPDH 引物, 1 x 20 μL (10 μM)
• 反向 GAPDH 引物, 1 x 20 μL (10 μM)
• 无核酸酶水, 2 x 1.25 mL
5 盒,各含:
• DNase I,无 RNase, 1 x 20 μL (1 U/μL)
• 10X DNase I 反应缓冲液,含 MgCl2, 1 x 1.25 mL
• EDTA, 1 x 1 mL (50 mM)
• 10X 反应缓冲液(不含 MnCl2)1 x 1 mL
• MnCl2,1 x 1 mL (100 mM)
将所有组分储存在 -20°C 下。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。