载体介绍：

DH10Bac感受态细胞通常用来生产用于真核细胞蛋白表达的重组杆状病毒分子。

高效DH10Bac细胞含有父Bacmid的bMON14272和辅助质粒pMON7124。父Bacmid的包含一个小型F复制子，卡钠霉素抗性基因，attTn7重组位点和lacZα互补因子。辅助质粒包含的tnsABCD的区域,提供了转座蛋白，这些转座蛋白可以 供体质粒(Donor plasmid)上的小Tn7位点插入到父本Bacmid的重组目的位点。辅助质粒pMON7124包含有四环素抗性(Tetracycline).

DH10Bac感受态细胞本身含有卡那霉素和四环素抗性。在制作感受态细胞的时候，需要加入这两种抗生素，以防止DH10Bac中的质粒父本杆粒bMON14272（卡那霉素抗性）和辅助质粒pMON7124（四环素抗性）在细胞扩增过程中丢失，提高质粒转化后的基因转座效率。

携带Tn7转座元件的 供体质粒pFastBac，含有庆大霉素抗性基因，杆状病毒多角体启动子，一个多克隆位点区域和SV40的poolyadenylation信号。 重组的Bacmid分子通过将多克隆位点包含有基因编码序列的 供体质粒pFastBa质粒DH10Ba感受态细胞转化与在编码序列克隆到多个克隆网站（重组成功的质粒在选择性培养基平板上呈现为白色菌落）。然后可以将重组Bacmid进行挑菌，小量提取分离并且转染到昆虫细胞，从而进行感染重组杆状病毒颗粒生产。

 

高效DH10Ba感受态细胞的能够有效抵抗连接酶和连接酶缓冲液，同时可以容忍少量未稀释的连接反应。 φ80dlacZDM15标记可以利用Bacmid载体中的β-半乳糖苷酶基因α-互补使用含X-gal平板培养基的蓝白斑菌落筛选。

 

综上所述，DH10Bac感受态细胞本身含有卡那霉素和四环素抗性，而供体质粒pFastbac含有庆大霉素的抗性，所以在制备DH10Bac感受态细胞时需要在培养时添加卡那霉素和四环素，而在制备杆粒时需要使用卡那霉素，四环素，庆大霉素的三抗平板。

产品参数：

出品公司：Invitrogen

菌株类型:E.coli

培养基: LB培养基

生长条件:37 ℃,  有氧

基因型: DH10Bac基因型

抗性:卡那，四环素

质粒转化条件:42 ℃热激

应用:重组杆粒生产菌株