中文名:Dnase I 溶液  1000u/ml

英文名:Dnase I solution

储存条件:−20°

产品简介

     DNaseI 是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链 DNA。其原理为 DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有 5'-磷酸基团和 3'-OH 的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或 Mn2+都可以激活 DNaseI 的活性，而 Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链 DNA 的每条单链上随机地产生切口；而在 Mn2+存在下可使双链 DNA 断裂，使DNA 片段化。用于无 DNA 污染的 RNA 的制备，逆转录及体外转录等实验。

组分说明：

Size	QYR2076-1ml	QYR2076-5ml
Dnase I (Rnase Free,1U/µl)	1ml	5ml
10×Reaction Buffer (with MgCl2)	1ml	5ml
200 mMEDTA	1ml	5ml

使用说明：

1.以制备用于RT-PCR的RNA样品为例，配制10µl反应体系为例，如下表：

组分	体积	终浓度
RNA	Xµl	1µg
10×ReationBuffer（withMgCl2）	1µl	1 µl
DNaseⅠ（RNaseFree）	1µl	1 µl
RNaseFreeWater	Yµl	补足至10µl

2． 37℃孵育30分钟。

3． 加入1µl200mMEDTA，65℃孵育10分钟，使DNaseⅠ失活，终止反应。

4． 处理后的RNA可用于RT-PCR。

注意事项：

1. 因为 DNaseI 经常用于需要保持 RNA 完整性的 DNA 消化实验，所以在酶制备过程中最大限度的避免了 RNase 污染，可以安全地用于 RNA 的提取，但由于该酶中不含RNase抑制剂，提醒使用时注意防止外源RNase的污染。10µl反应体系也可选择加入1U的Rnase抑制剂。

2. DNaseI 受剪切力的影响比较大，使用前可以将离心管上下颠倒混匀，避免涡旋震荡。

3. 每处理 1μgRNA，DNaseI 用量不要超过 1U。