中文名:膜再生液（碱性，含SDS和β-ME），一抗二抗剥离液

英文名:Stripping Buffer（with SDS and β-ME）

储存条件:RT

产品简介

    膜再生液亦即 Western 一抗、二抗去除液（Stripping buffer），用于 Western 中转移了蛋白的膜的重复利用。在 Western 中完成了一抗、二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测 tubulin、actin 等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用膜再生液，充分去除一抗、二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个 SDS-PAGE 胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样所形成的误差，使可比性更强。

    使用膜再生液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本品经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜 3-5 次。使用本试剂只需大约 30-40 分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的 Western 操作。

使用说明：

 1. 在完成 Western 化学发光检测后，蒸馏水中漂洗 5 分钟。

 2. 弃蒸馏水，加入适量的膜再生液，至少需把膜完全覆盖。置50℃水浴箱中 30min，间断振摇。

 3. 弃膜再生液，并吸尽残余液体。加入 TBS、TBST 或 PBS 漂洗 3-4 次，每次在摇床上漂洗 3-5 分钟。

 4. 进行封闭(blocking)等 Western 的后续操作。

 5. 如抗体结合量较高，可再重复一次步骤2和3。

注意事项：

 1、使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭(blocking)都应当使用 5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。

 2、本款膜再生液（含SDS）仅适用于 PVDF 膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。

 3、使用 ECL、BeyoECL 等类似的化学发光试剂进行的 Western 检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的 Western 检测，例如 DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。

 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。