5×非还原蛋白上样缓冲液

名称：5×非还原蛋白上样缓冲液（不含DTT, 巯基乙醇）

英文名称：5×Protein Loading Buffer (without DTT or β-ME)

目录号：QYR048

规格：10ml

保存条件：-20℃

保质期：2年

溶液成分：由甘油，Tris-HCl, SDS, 溴酚蓝等成分组成。

产品描述：

5×非还原蛋白上样缓冲液（不含DTT，巯基乙醇）适用于非还原SDS-PAGE电泳时蛋白质上样用。SDS可与蛋白结合，蛋白-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白本身电荷的差异。SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白分子的二级和三级结构最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚基），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳指示剂，可大概指示电泳结束的时间。有的抗体仅仅识别非还原形式的蛋白，如氧化形式(特别是半胱氨酸残基)的蛋白，此时上样缓冲液和电泳缓冲液中不能含有还原剂。

 

使用说明：

 

1、每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。

 

2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。

 

3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。

 

注意事项：

 

1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。

 

2、本试剂有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。