中文名:胰蛋白酶消化液(0.25%,不含酚红)
英文名:Trypsin Solution, Without EDTA and Phenol Red
储存条件:-20°C
胰酶消化液分为:
2.5%浓度的储存液,一般使用浓度是 0.25%。
0.25%的即用型胰酶消化液,分含酚红和不含酚红两种。
0.25%的即用型胰酶消化液,含 0.02% EDTA ,分含酚红和不含酚红两种。
使用方法:
1. 贴壁细胞的消化:
a. 吸去培养液,用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b. 加入少量胰酶消化液,略盖过细胞即可,室温放置 30 秒至 2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c. 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细 胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实 验。
d. 如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞, 即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
a. 不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1.在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2.胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录:不同胰酶细胞消化液的比较和选择
1. 如果希望消化能力比较强,推荐使用含有 EDTA 的胰酶消化液,消化能力相对更强一些。
2. 如果希望观察比较方便,推荐选择含酚红的胰酶消化液。
3. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析,推荐选择不含酚红的胰酶消化液。
4. 对于 EDTA 可能会干扰后续的测试分析时,推荐不含 EDTA 的胰酶消化液。