中文名:革兰氏染色试剂盒
英文名:Gram Stain Kit
储存条件:2-8°C
名称
4*10ml
4*100ml
4*500ml
保存条件
试剂A :结晶紫染色液
10ml
100ml
500ml
2-8℃
试剂B :番红O染色液
10ml
100ml
500ml
2-8℃
试剂C :碘液
10ml
100ml
500ml
2-8℃,避光
试剂D :脱色液
10ml
100ml
500ml
室温或2-8℃
产品简介
本产品有四种溶液组成,样品通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结 晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或 丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能 把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含 量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网 不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就 使革兰氏阴性菌呈红色。
标本处理: 有菌部位的标本,如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。 无菌部位的标本,如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等,应取适量标本(最高可达 5-7ml),经 3000rpm 离心 10min,取沉渣涂片染色。
涂片制作: 菌液涂片时,用接种环沾取菌液点在载玻片上,标本可直接在玻片上涂布;菌落涂片时,先取 生理盐水一滴,置玻片上,用接种针挑取菌落在盐水中涂布。制作的涂片应自然干燥,并经火焰固 定,固定的温度不宜过高,以玻片背面接触手背不烫为准,否则可能使细菌形态改变。将固定后的 涂片进行染色。
染色步骤:
1.初染:在已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色 1 分钟,水洗。
2.媒染:滴加革兰氏碘液,作用 1-3 分钟,水洗。
3.脱色:滴加 95%酒精,并频频摇动玻片,至无紫色脱出为止(约 20 秒),水洗。
4.复染:加沙黄(番红 O)染液,复染半分钟,水洗,用吸水纸印干后,油镜检查。
结果:葡萄球菌:紫色、球形、葡萄状排列。大肠杆菌:红色、杆状、散在排列。
注意事项:
1.标本涂片不能太厚,若涂片较厚,应延长脱色时间,直至不再出现紫色为止。
2.玻片通过火焰温度不能太高。
3.碘液变透明,则不能使用。
4.水洗时动作要轻柔,沿载玻片对角线方向用洗瓶冲洗,以免把菌体冲掉。