商品基本信息:
MagBead Buccal Swabs DNA Kit
磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒
目录号：QYM106S(5t), QYM106A(20t), QYM106B(200t)
产品内容：
5次
20次
200次
buffer SCL
2ml
8ml
80ml
buffer PC
3ml
12ml
120ml
buffer WB1
4ml
16ml
160ml
buffer WB2
4ml
16ml
160ml
buffer EL
250ul
1ml
10ml
Proteinase K
100ul
400ul
4ml
RnaseA
50ul
200ul
2ml
Magbeads
250ul
1ml
10ml
产品简介：
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于口腔拭子基因组DNA提取的方法，可用于提取人类口腔拭子基因组DNA。口腔拭子刮取的口腔上皮细胞在裂解液与Proteinase K共同作用下彻底裂解，释放基因组DNA。加入结合液后，DNA大量析出，被磁珠特异性吸附。经漂洗和洗脱，得到纯净的基因组DNA。可直接用于测序、PCR、克隆等下游实验。
产品特点：
所需组织量少，高效，快速。样本充分裂解后，仅需30-40min，即可获得高纯度口腔拭子基因组DNA。
单个口腔拭子的DNA得率为1-3ug。
与液体工作站或磁棒法自动磁珠提取系统配套使用，可以简单、快速地进行大规模提取。
保存条件：
室温，4℃（磁珠, Proteinase K, RnaseA）
注意事项
1. 口腔拭子DNA含量在不同人类个体、不同采集批次中差异较大。
2. 若buffer SCL中有沉淀，请在60℃水浴中溶解后使用。
3. Proteinase K, RnaseA勿反复冻融。可在4℃保存1个月。若长期保存请放于-20℃。
操作步骤：
1. 将一个口腔拭子转移至2ml EP管中，用1ml生理盐水或PBS充分洗涤。将口腔拭子木杆部分折断，头部浸泡在洗涤液中，盖上管盖，涡旋混匀20s。弃去口腔拭子。
2. 将含细胞的液体12000rpm 离心1min。弃去上清。
3. 向沉淀中加入400ul buffer SCL，20ul Proteinase K（10mg/ml）。吹打混匀。60℃水浴裂解细胞15min。此时溶液变清亮。裂解细胞后，如吹吸溶液时感觉粘稠，请适当延长裂解时间。
4. 向组织裂解液中加入10ul RnaseA (10mg/ml)，吹打混匀，室温静置5min。
5. 向细胞裂解液中加入600ul buffer PC，颠倒混匀数次。
6. 在漩涡混匀器上震荡磁珠20s，使其均匀悬浮。向反应混合物中加入50ul MagBeads，涡旋混匀10s。室温静置3min。将离心管插入磁力架，磁性分离。弃上清。
7. 将离心管取下，加入800ul buffer WB1。涡旋混匀10s。将离心管插入磁力架，磁性分离。弃上清。
8. 将离心管取下，加入800ul buffer WB2。涡旋混匀10s。将离心管插入磁力架，磁性分离。弃上清。
9. 将离心管在磁力架上开盖静置5-10min，使管内液体完全挥发。可用枪头吸弃管底、管壁残留的液滴。
10. 将离心管取下，加入50ul buffer EL。用枪头搅拌成团的磁珠，吹打混匀数次，将磁珠完全打散。60℃水浴洗脱5min。
11. 将离心管插入磁力架，磁性分离。小心将上清吸取到新的EP管中，勿吸入磁珠。上清即为口腔拭子基因组DNA。
